客服熱線:400-901-9800          客服QQ:4009019800          技術答疑   技術支持   質量反饋   人才招聘   聯系我們
首頁 > 新聞動態 > 正文
免疫細胞分型常見標志物大串燒(三)——B細胞分型標志物
發表者:北京博奧森生物      發表時間:2019-8-27


一、B細胞的背景

      B淋巴細胞簡稱B細胞,是由骨髓中的造血干細胞分化發育而來。與T淋巴細胞相比,它的體積略大。B淋巴細胞受抗原刺激后,會增殖分化出大量漿細胞。漿細胞可合成和分泌抗體并在血液中循環。大部分發揮效應功能的B細胞在體內存活的時間較短,僅數天至數周,但其記憶細胞在體內可長期存在1。
      B細胞也是一異質性群體,顯示不同的功能和表面標志。CD5表達與否,將B細胞分為B1和B2兩個亞群。B1細胞為CD5+B細胞,主要識別非蛋白質抗原,屬于固有類淋巴細胞,B2即通常指的B細胞,為CD5-B細胞,主要識別蛋白質抗原。在Th細胞的輔助下,B2細胞才能被完全激活并介導對T細胞依賴抗原的免疫應答,產生特異性抗體。B2細胞介導的免疫應答特點為:可發生體細胞突變,有親和力成熟,產生高親和力抗體,可產生免疫記憶細胞1。

二、B細胞的功能
1. 產生抗體介導體液免疫應答
◆中和作用:針對病毒、胞內寄生菌、細菌外毒素。
◆調理作用:針對胞外復制的細菌。
◆參與補體的溶細胞或溶菌作用。
◆抗體依賴細胞介導的細胞毒性作用(ADCC):針對病毒感染細胞、腫瘤細胞。
2. 提呈可溶性抗原
B細胞是一類抗原提呈細胞,活化后其表面BCR結合可溶性抗原,通過內吞和加工后,以抗原肽-MHC Ⅱ類分子復合物形式提呈給CD4+T細胞。
3. 參與免疫調節
激活的B細胞產生大量細胞因子、參與免疫調節、炎癥反應及造血。

三、B細胞的分化和成熟
      哺乳類動物B細胞的分化和成熟主要分為祖B細胞、前B細胞、不成熟B細胞、B細胞的成熟(過渡B細胞到成熟B細胞)、活化B細胞和漿細胞幾個階段2。其中祖B細胞、前B細胞和不成熟B細胞的分化是抗原非依賴的,其分化過程在骨髓中進行??乖覽到錐問侵賦墑霣細胞在抗原刺激后活化,并繼續分化為合成和分泌抗體的漿細胞,這個階段的分化主要是在外周免疫器官中進行的。
  祖B細胞(pro-B cell)
     這種發育早期的B細胞,發生在人胚胎約第9周開始,小鼠約第14天開始。尚未表達B細胞系的特異表面標志,也未發生lg基因重排,仍處于胚系基因(germline)階段。但祖B細胞的晚期可出現B系特異標志,Thy-1 、Tdt 、B200 、mb-1 等分子。
  前B細胞(pre-B cell)
     是前B細胞是在骨髓中由祖B細胞分化而來,只存在于骨髓和胎肝等造血組織,約占成人骨髓有核細胞的5%。前B細胞胞漿中可檢測到IgM的重鏈μ鏈,但無輕鏈,也無膜表面Ig的表達,因此缺乏對抗原的反應能力。末端脫氧核甘酸轉移酶(terminal deoxy nucleotidyl transferase,TdT)以及共同型急性淋巴母細胞白血病抗原(common acute lymphoblastic leukaemia antigen,CALLA,即CD10)可表達在前B細胞,進入非成熟B細胞后這兩種標志即消失,因此TdT和CD10對于區分前B細胞與B細胞其它發育階段非常有用。此階段還表達MHCⅡ、CD19、CD20和CD24等分化抗原。其中CD19、CD20、和CD22在胞漿中的出現均早于μ鏈。前B細胞對抗原無應答能力,不表現免疫功能。
 不成熟B細胞(immature B cell)
     此階段發生輕鏈基因重排,故可組成完整的IgM分子,并表達于膜表面(IgM),可稱為Bμ細胞。此種細胞如與抗原結合,易使膜受體交聯,產生負信號,使B細胞處于受抑狀態,不能繼續分化為成熟B細胞。這種作用可能是使自身反應B細胞克隆發生流產,是形成B細胞自身耐受的機制之一。不成熟B細胞開始喪失Tdt和CD10,但可表達CD22、CD21及FcR。同時CD19、CD20以及MHCⅡ類分子表達量增加。

圖1:早期B細胞的分化過程及主要標志

CLPs, common lymphoid progenitors; BM, bone marrow; RAG, recombinase activating genes; TdT, terminal deoxynucleotidyl transferase; SLC, surrogate light chain; BCR, B cell receptor
 B細胞的成熟
      未成熟的B細胞將在幾天內離開骨髓,并進入循環系統作為過渡B細胞(transitional B cells)。根據細胞表面標記的表達和功能,將過渡B細胞細分為3組:T1、T2和T3 B細胞3。這些細胞可以在血液和次級淋巴器官中發現,但很少進入淋巴管。這些過渡細胞代表分化為更成熟的前免疫B細胞群之前的最后階段,分別為濾泡(follic-lar,FO) B細胞、邊緣區(marginal zone,MZ) B細胞、生發中心(germinal center,GC) B細胞和記憶性(memory)B細胞。過渡B細胞轉變為成熟B細胞亞群的機制沒有完全研究清楚,細胞因子的可用性、BCR特異性和與預先存在的成熟B細胞的競爭都發揮了作用4。

     過渡B細胞成熟主要發生在脾臟中,T1 B細胞通過BAFF家族的配體和受體介導的信號刺激,而成熟為T2 B細胞。T1 B細胞存在于脾髓和毛囊外的外周動脈淋巴管套(PALS),T2B細胞存在于濾泡5。在脾臟中也發生基于抗原的過渡B細胞的選擇,以確保那些對自身抗原具有低親合力的成熟B細胞的存活,以及清除那些對自身抗原具有高親和力的成熟B細胞。然后,T2 B細胞分化成能夠進入生發中心的循環B細胞或填充于邊緣區的非循環B細胞。生發中心中的B細胞成熟與抗體V區基因的體細胞超突變相關,這提供了產生對抗原具有高親和力的抗體的基礎2。離開生發中心的抗原選擇的B細胞變為記憶性B細胞或漿母細胞(plasmablasts)。

表2 人和小鼠的外周B細胞亞群的表面標記、相關轉錄因子和定位

TACI, transmembrane activator and cyclophilin ligand interactor; BCMA, B cell maturation antigen; BR3, B lymphocyte stimulator receptor 3; Ig, immunoglobulin. 

 活化B細胞(activated B cell)
     成熟B細胞被相應抗原或多克隆刺激劑刺激后成為活化B細胞,繼而發生增殖和分化,在此過程中,膜結合Ig水平逐漸降低,而分泌型Ig逐漸增加,并可發生免疫球蛋白基因重鏈類別的轉換?;罨疊細胞中的一部分可分化為小淋巴細胞,停止增殖和分化,并可存活數月至數年,當再次與同一抗原接觸時,很快發生活化和分化,產生抗體的潛伏期短,抗體水平高,維持時間長,這種B細胞稱為記憶B細胞(memory B cell)。

 漿細胞(plasma cell,PC)

     又稱抗體分泌細胞(antibody secreting cell)。成熟B細胞接受抗原刺激后,在抗原提呈細胞和Th細胞的輔助下成為活化B細胞,進而分化為漿細胞。當成熟B細胞分化為漿細胞時,B細胞表面的部分標志消失,并出現一些新的漿細胞特有標志,如漿細胞抗原-1(PCA-1)等分子,而mIg, MHCⅡ類抗原、CD19、CD20、CD21、CD22等標記消失。并可發生Ig的類別轉換,從產生IgM轉換為產生IgG 、IgA或IgE的B細胞。


四、常見B細胞的表面標志及Bioss產品

參考文獻
1.LeBien TW and Tedder TF (2008). Blood 112, 1570-1580.
2.Tobòn GJ et al. (2013). Autoimmune Dis 2013, 827254.
3.Palanichamy A et al. (2009). J Immunol 182, 5982-5993.
4.Naradikian MS et al. (2014). (Springer Basel), pp. 11-35.
5.Chung JB et al. (2002). International Immunology 14, 157-166.

版權所有 2016-2020 莱斯特城赛程 www.wbthnx.com.cn 北京博奧森生物技術有限公司 京ICP備05066980號 京公網安備110107000727號
通過國際質量管理體系ISO9001:2008 GB/T19001-2008認證    編號:00115Q211807R1M/1100